News

Javascript hè attualmente disattivatu in u vostru navigatore.Alcune funziunalità di stu situ web ùn funziona micca se JavaScript hè disattivatu.
Registrate cù i vostri dettagli specifichi è a droga specifica d'interessu, è currisponderemu à l'infurmazioni chì furnite cù articuli in a nostra vasta basa di dati è vi email una copia PDF immediatamente.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Department of Infectious Diseases, Suzhou University First Affiliated Hospital, Suzhou City, Jiangsu Province, 215000 Tel.tumuri di u sistema digestivu cù una sopravvivenza generale di 5 anni di 14,1%.Parechji pazienti cun HCC sò diagnosticati in un stadiu avanzatu, cusì u screening precoce hè essenziale per riduce a mortalità da HCC.In più di l'indicatori di rilevazione cumunimenti usati, cum'è l'alfa-fetoproteina di serum (AFP), l'alfa-fetoproteina reattiva à a lectina di lente (AFP-L3), è a protrombina anormale (proteina II indotta da carenza di vitamina K, PIVKA-II), tecniche di biopsia fluida. Hè statu dimustratu per esse di valore diagnosticu in a deteczione di HCC.Comparatu à i prucessi invasivi, a biòpsia fluida pò detectà i metaboliti maligni circulanti.I tecnichi di biopsia fluida rilevanu e cellule tumorali in circulazione, l'ADN di tumore circulante, l'RNA circulante è l'esosomi è sò usati per a screening precoce, u diagnosticu è a valutazione prognostica di HCC.Questu articulu rivede a biologia molekulari è l'applicazione di diverse tecniche di biopsia fluida per isolà biomarcatori promettenti chì ponu esse opzioni viabili per a valutazione precoce di HCC per migliurà a screening precoce di i gruppi HCC d'altu risicu.Parole chjave: tecnica di biopsia fluida, carcinoma epatocellulare, gruppu à risicu altu.
U carcinoma hepatocellulare (HCC) hè un tumore malignu cumuni di u trattu digestivu, chì si trova in u sestu postu trà i novi casi di tumori maligni in l'omi è in e donne.1 In u mondu sanu, u cancru di u fegatu hè a terza causa di morte per cancro dopu à u cancer di u pulmone è di u culurale, cuntendu l'8,3% di i morti legati à u cancer da tutti i neoplasmi maligni.1 Le pronostic du CHC est étroitement lié au stade du diagnostic.I mutivi principali per a sopravvivenza povira in HCC sò metastasi intrahepatiche, trombi di tumore venoso portali, è metastasi distanti chì impediscenu a resezione, è assai di sti caratteristiche sò digià prisenti in i pazienti à u mumentu di u diagnosticu.
Basatu nantu à e linee di diagnostichi è di trattamentu, i principali fatturi di risichi per u sviluppu di HCC sò cirrosi di u fegato, infezzione da virus di l'hepatitis B cronica (HBV) o virus di l'hepatitis C (HCV), a malatia di fegatu grassu alcoòlicu è a malatia di fegatu grassu non alcoolicu (NAFLD). ).2 Inoltre, i fatturi di risichi per l'HCC includenu l'ingesta alimentaria cuntaminata da aflatossina, schistosomiasis, altre cause di cirrhosis, una storia di famiglia di cancro di fegatu, diabete, obesità, fume è ferita di fegatu induva da droga.I gruppi d'altu risicu di 35 è 45 anni duveranu avè cuntrolli medichi regulari.A screening precoce hè una strategia di trattamentu iniziale impurtante per migliurà a sopravvivenza generale di i pazienti cun HCC.
Biomarcatori cum'è AFP, AFP-L3 è PIVKA-II sò cunsigliati per u screening precoce di HCC3,4.I tecnichi di biopsia liquida anu dimustratu risultati promettenti in u diagnosticu precoce è a valutazione di trattamentu.5,6 Un prugressu significativu hè statu fattu in a biòpsia liquida HCC, chì pò avè una sensibilità è una specificità più altu ch'è i marcatori di serum cumunimenti usati cum'è AFP (Table 1).
AFP hè un biomarcatore largamente utilizatu in HCC è hè attualmente u biomarcatore più detallatu largamente utilizatu per a screening precoce, u diagnosticu è a valutazione di a malatia.Un livellu persistente di AFP hè cunsideratu un fattore di risicu per a progressione di HCC.7,8 A rata di deteczione di carcinoma hepatocellulare (sHCC) hè in crescita cù u sviluppu di l'ultrasound è a tomografia computerizzata, è l'AFP hè stata trovata particularmente insensibile à a deteczione di hHCC in a pratica clinica.Sicondu un studiu retrospettivu multicentric9, AFP pusitivu hè stata trovata in 46% (616/1338) di i casi HCC è 23.4% (150/641) di i casi sHCC.Inoltre, i livelli di AFP sò elevati in i malati cù a malatia di fegatu crònica è cirrhosis.10 Cusì, l'AFP hà un effettu di screening limitatu per sHCC.11 Sicondu l'Asia-Pacific Clinical Practice Guidelines for Hepatocellular Carcinoma, l'usu di AFP ùn hè micca cunsigliatu.12 L'evidenza clinica suggerisce chì PIVKA-II hè superiore à AFP in u trattamentu di HCC è chì a cumminazzioni di PIVKA-II è AFP hà. un valore diagnosticu più altu in HCC.13 Paragunatu à a biòpsia di tissuti, a biopsia di fluidu rileva principalmente metaboliti associati à u tumore in i fluidi di u corpu (sangue, saliva, fluidu pleurale, fluidu cerebrospinale, o urina) è hè menu invasive à i tessuti.14 Inoltre, i biòpsi liquidi ponu riflette caratteristiche maligne chì ùn sò micca prisenti in u tissutu tumorale primariu.15 I biopsii liquidi ùn sò micca stati pruvati in a pratica clinica per tutti i tipi di tumuri, ma u so potenziale diagnosticu in u cancer attrae l'attenzione di l'oncologi.16 A biòpsia fluida pò detectà e cellule tumorali circulanti (CTC), DNA di tumore circulante (cDNA), RNA circulante liberu (ecRNA) è esosomes.In questu articulu, discuteremu e caratteristiche, u rolu è l'applicazione di diverse tecniche di biopsia fluida in u screening precoce di i gruppi HCC d'altu risicu.
L'ADN extracellulare (cfDNA) in campioni di sangue da individui sani hè statu scrittu prima in u 1948 da Mandel et al.17 cfDNA è un frammento di DNA privo di cellule di circa 160-180 bp di lunghezza, originario principalmente da linfociti e cellule mieloidi.ctDNA hè un fragmentu specificu di DNA mutante liberatu da e cellule tumorali in u sangue perifericu, chì rapprisenta l'infurmazione genomica di e cellule tumorali dopu certi prucessi fisiopatologichi, cumprese necrosi, apoptosi è escrezione.A proporzione di ctDNA in u cfDNA tutale varieghja largamente cù u tipu di tumore, è i frammenti di cDNA sò rappurtati di solitu esse menu di 167 bp in lunghezza.18 U studiu di Underhill hà dimustratu chì i frammenti di cfDNA sò generalmente più brevi di u cfDNA normale.19 In cunfrontu à l'individui sani, a durata tutale di frammenti di cfDNA in u sangue di i malati di cancru hè più corta, cusì cfDNA pò esse usatu cum'è un indicatore di screening tumorale precoce.L'arricchimentu di certi subsets di lunghezze di frammenti cfDNA pò migliurà a deteczione di cDNA assuciata à tumuri solidi non metastatici.I studii anu dimustratu chì u ctDNA si trova in più di u 75% di i cancers avanzati di pancreas, colon, vejiga, gastrointestinali, fegato, ovariu, pettu, melanoma è di testa è di u collu.20,21 Tuttavia, a quantità di ctDNA in u sangue dipende da u locu di u tumore.22 In un studiu di Bettegoud, i pazienti cun cancers colorectal, pettu, fegato, pulmone è prostata anu trovu livelli più altu di cDNA in u so sangue cà altri cancers.In cuntrastu, in i malati cù cancru orali, cancru pancreatic, cancru gastricu è glioma, a cuncentrazione di cDNA in u sangue era più bassu.vinti unu
Perchè ctDNA cuntene e stesse mutazioni genetiche cum'è e cellule tumorali primarie, cDNA pò esse usatu per detectà mutazioni eterogenee specifiche di tumore è cambiamenti epigenetici, cumprese metilazione, idrossimetilazione, variazioni di nucleotidi unichi è variazioni di numeru di copia.vinti trè
A metilazione di l'ADN hè unu di i cambiamenti epigenetici più cumuni chì risultatu in a ripressione genica.In cunfrontu cù e cellule nurmali, ci sò differenzi in u livellu generale di metilazione di u genoma di e cellule tumorali, in particulare in a metilazione di i geni suppressori di tumore, chì ponu esse rilevati in una fase iniziale, chì suggerenu chì i cambiamenti in a metilazione di l'ADN pò esse un indicatore di i primi tempi. rilevazione di tumorigenesis.I geni suppressori di u tumore assuciati à HCC ponu esse inattivati ​​da a metilazione di u promotore, stimulendu cusì a tumorigenesi.24 A metilazione di l'ADN hè un marcatore ideale per u diagnosticu precoce di tumuri per via di a so specificità tissutale, a rilevabilità è l'indipendenza di l'età.Inoltre, a metilazione di l'ADN hè più cumuni cumparatu cù mutazioni somatiche perchè ci sò più regioni di destinazione è parechji siti CpG alterati in ogni regione di u genoma di destinazione.25 In più di parechji siti CpG, un gran numaru di lochi ipermetilati indipendenti in ctDNA sò stati identificati in DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 è RGS10.26 Xu et al.A comparazione di campioni di cfDNA da 1098 pazienti HCC è 835 cuntrolli sani era chì i geni assuciati à l'HCC sò stati trovati in forte correlazione cù e signatures di metilazione di cDNA plasma currispondenti.25 Basatu nantu à l'analisi di u laboratoriu, hè statu sviluppatu un mudellu predittivu chì cuntene 10 marcatori di metilazione cù sensibilità è specificità di 85,7% è 94,3%, rispettivamente, è questi marcatori sò assai correlati cù a massa tumorale, u stadiu di u tumore è a risposta à u trattamentu.Questi risultati indicanu chì l'usu di i marcatori di metilazione di cDNA hè una grande prumessa in u diagnosticu, u monitoraghju è u pronostico di HCC.In un mudellu di metilazione custituitu da trè geni metilati aberrante (APC, COX2, RASSF1A) è un miRNA (miR203) presentatu da Lu et al27, a sensibilità è a specificità di u mudellu 27 per diagnosticà l'HCC associatu à HBV eranu paragunabili.80%.Inoltre, u mudellu puderia detectà u 75% di i pazienti HCC senza diagnostichi cù un livellu AFP di 20 ng / mL.U genu per a proteina 1A di famiglia di domini associata à Ras (RASSF1A) hè a sequenza di DNA ripetitiva principale in u genoma umanu.Araujo et al.hà cunclusu chì l'ipermetilazione di u promotore RASSF1A puderia esse un biomarcatore preziosu per a screening precoce di HCC è un target molecular potenziale per a terapia epigenetica.28 In un studiu, l'ipermetilazione di u promotore RASSF1A di serum hè stata trovata in u 73.3% di i pazienti cun HCC.29 L'elementu 1 di nucleotidi interspersed long (LINE-1) hè un altru mediatore di retrotrasposizione altamente attivu.L'ipometilazione di LINE-1 hè stata truvata in l'ADN di u 66.7% di i campioni di serum HCC è hè stata assuciata cù a recurrenza precoce è a sopravvivenza povira dopu a resection radicali.29 L'ipermetilazione hè un prucessu geneticu cumuni chì ghjoca un rolu unicu in u sviluppu di cirrosi di fegatu è HCC.30 In cuntrastu, l'idrossimetilazione hè un prucessu di demetilazione chì induce a riattivazione è l'espressione di geni, è a rilevazione di u pruduttu 5-hydroxymethylcytosine (5-hmC) in questu prucessu pò esse usata per identificà un tumore.A metilazione è l'idrossimetilazione di cDNA sò assuciati cù a tumorigenesi è ponu cuntribuisce à u screening precoce di HCC.In un studiu di 2554 sughjetti, 31 genome-wide 5-hmCs sò stati trovati in campioni di cfDNA, è 32 genes sò stati identificati paragunendu sequenze 5-hmC in pazienti HCC è gruppi d'altu risicu, cum'è quelli cù malatie croniche.Modelli di diagnostichi di malatie liver.è cirrosi.Ce modèle était supérieur à l'AFP pour distinguer le HCC du tissu non tumoral.
Mutazioni in e regioni codificanti ponu purtà à anormalità trascrizionale, chì ponu purtà à cambiamenti in sequenze di proteine ​​​​è in ultimamente u cancer.Varianti di nucleotidi unichi sò marcatori genomici impurtanti per a screening di tumore precoce per via di a so alta affidabilità di tissuti è di a so alta specificità di tumore è tissutu.Numerosi studii riguardanti HCC chì utilizanu a sequenza di a prossima generazione (NGS) per l'esoma è a sequenza di u genoma sanu di u cancer anu identificatu geni cellulari mutati cumuni cum'è TP53 è CTNNB1, è ancu parechji cumpresi ARID1A, MLL, IRF2.I novi geni, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 è JAK1 mostranu tassi di mutazione moderatu. L'analisi di a funzione genica mutante suggerisce chì alterazioni in a rimodellazione di cromatina, Wnt / β-catenina è trasduzione di segnali JAK / STAT, a via di u ciclu cellulare P53, modificatori epigenetici, vie di stress ossidativu, a via PI3K / AKT / MTOR è a via RAS / RAF / A via MAPK kinase ghjoca un rolu cruciale in l'oncogenesi di HCC.32,33 In un studiu in quale mutazioni associate à tumore sò state rilevate, Huang et al anu truvatu chì a freccia di mutazioni associate à tumore dipendente da ctDNA era 19.5%, è a specificità era 90% .34 Inoltre, i pazienti chì anu avutu l'invasione vascular era più prubabile di avè mutazioni di ctDNA (P = 0.041) è sopravvivenza senza recurrence più corta (P <0.001). L'analisi di a funzione genica mutante suggerisce chì alterazioni in a rimodellazione di cromatina, Wnt / β-catenina è trasduzione di segnali JAK / STAT, a via di u ciclu cellulare P53, modificatori epigenetici, vie di stress ossidativu, a via PI3K / AKT / MTOR è a via RAS / RAF / A via MAPK kinase ghjoca un rolu cruciale in l'oncogenesi di HCC.32,33 In un studiu in quale mutazioni associate à tumore sò state rilevate, Huang et al anu truvatu chì a freccia di mutazioni associate à tumore dipendente da ctDNA era 19.5%, è a specificità era 90% .34 Inoltre, i pazienti chì anu avutu l'invasione vascular era più prubabile di avè mutazioni di ctDNA (P = 0.041) è sopravvivenza senza recurrence più corta (P <0.001).L'analisi di a funzione di geni mutanti suggerisce chì i cambiamenti in a rimodellazione di cromatina, Wnt / β-catenina è signalazione JAK / STAT, a via di u ciclu cellulare P53, i modificatori epigenetici, i percorsi di stress ossidativu, a via PI3K / AKT / MTOR è a via RAS / RAF / MAPK kinase ghjucanu. un rolu criticu in l'HCC tumorigenesis.32,33 In un studiu chì truvò mutazioni associate à u tumore, Huang et al.truvò chì a freccia di mutazioni associate à u tumore dipendente da ctDNA era 19.5% è a specificità era 90%..34 Кроме того, у подией чаз в цдк (p = 0.041: И Оолее кани в церециди бемость (p <0,001). .34 Inoltre, i malati cù l'invasione vascular anu avutu più mutazioni di cDNA (P = 0.041) è una sopravvivenza senza malatia più corta (P <0.001).L'analisi funzionale di i geni mutanti hà revelatu a rimodellazione di a cromatina, a signalazione Wnt / β-catenina è JAK / STAT, a via di u ciclu cellulare P53, i modificatori epigenetici, a via di stress ossidativu, a via PI3K / AKT / MTOR, è a via RAS / RAF / MAPK. A via di kinase ghjoca un rolu criticu in l'oncogenesi di HCC. 32,33 在 一 项 检测 肿瘤 相关 突变研究 中, H突变 人 Ctdna 的 特异性特异性 U 90% 患者 更 有 侵犯 发生 CTDNA突变（P=0.041）和更短的无复发生存期（P<0.001）。 32.33 在 一项 突变 相关 突变 的 的 的 的 研究ang 在关 特异性特异性 90% ..S 此外 经历 发生 Ctdna 突变 (P =.041) 和和短的无复发生存期（P<0.001）。32,33 In un studiu chì truvò mutazioni associate à i tumori, Huang et al.truvò chì i mutazioni associati à u tumore eranu 19,5% dipendenu da cDNA cù una specificità di 90% 34. Inoltre, i malati chì avianu sottumessu invasione vascular eranu più prubabile di sviluppà cDNA.мутация (P = 0,041) è более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mutazione (P = 0,041) è sopravvivenza senza malatia più corta (P <0,001).Un altru genu di cunduttore HCC cumuni hè TP53, chì hà una rata di mutazione di più di 30%.I studii anu dimustratu chì a freccia di mutazioni TP53 in ctDNA in u sangue è l'urina varieghja da 5% à 60%.35 U studiu di Johan hà dimustratu chì u spettru di mutazione di ctDNA in u tardiu HCC hà un ritmu di mutazione simili à u primu HCC, cumpresu u promotore TERT (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), mutazioni in AXIN1 ., ARID2, KMT2D è TSC2 (6% ognunu).36 L'oncogène β-catenine (CTNNB1) joue un rôle important dans la voie de signalisation Wnt.U coactivator di trascrizione CTNNB1 pò prumove l'espressione genica, chì pò purtà à a proliferazione cellulare, l'inibizione di l'apoptosi è l'angiogenesi.CTNNB1 pò ancu interagisce cù TERT per induce a trasfurmazioni di l'hepatocyte.33 U promotore TERT hè spessu mutatu in certi tumuri solidi.L'alterazioni in TERT, unu di i primi cambiamenti genetichi in a trasformazione maligna di HCC, ponu purtà à a reattivazione di telomerasi in l'hepatocytes cirrhotic è pò prumove a proliferazione è impediscenu l'anziane.Mutazioni in u promotore 33-37 TERT sò stati rappurtati in u 59-90% di i malati cù noduli di fegatu proliferative è HCC precoce è sò assuciati cù a sopravvivenza.38
I cambiamenti di u numeru di copia (CNA) sò un subtipu impurtante di mutazioni somatici.A ricerca hà dimustratu chì a carica diffusa è focale di CNA hè una firma genomica capace di predichendu l'infiltrazione immune di tumore è l'esclusione in certi tipi di cancru.39 Segnale di infiltrazione attiva, attività citolitica alta, inflammazione severa è marcatori genetichi associati à a presentazione di l'antigenu in HCC.L'analisi di l'array di dati di polimorfismi di nucleotidi unichi in 477 sughjetti anu revelatu una bassa carica nantu à u CNS.In cuntrastu, i tumuri chromosomalally inestables cù una alta carica CNA estensiva dimustravanu segni di reiezione immune è sò stati assuciati cù proliferazione, riparazione di DNA è disfunzioni TP53.Xu et al.hà dimustratu chì u gruppu HCC hà avutu punteggi CNA più altu ch'è u gruppu di malatie cronica di u fegatu.40 Aduprendu a sequenza di u genoma sanu di una sola cellula, i CNA sò stati trovati apparsu prima di l'hepatocarcinogenèse è restanu relativamente stabile durante a progressione tumorale.41 Chung et al.truvò chì i livelli di cfDNA eranu significativamente elevati in i pazienti HCC è chì i CNA di u genoma in cfDNA eranu un marcatore prognosticu indipendente impurtante in i pazienti HCC trattati cù sorafenib.42 I Pacienti cù una carica CNA più alta eranu più probabili di avè a progressione di a malatia è a morte di quelli chì anu una carica CNA più bassa.Ollerich et al.truvò chì l'indice di inestabilità di u numeru di copie (CNI) pò esse usatu per valutà CNA in cfDNA di i malati di cancru.Anu nutatu chì i pazienti cun cancru avanzatu anu puntuatu CNI significativamente più altu ch'è un gruppu di cuntrollu, chì valuta a risposta di i pazienti à a quimioterapia sistemica è l'immunoterapia.43 Questi risultati suggerenu chì i CNA truvati in i specimens di biopsia liquida ponu serve cum'è indicatori prognostici in i malati cun cancer avanzatu.HCC nantu à u fondu di a terapia sistemica.
Attualmente, i metudi utilizati per detectà ctDNA ponu esse divisi in metudi mirati è micca mirati.In breve, i metudi mirati cum'è a reazione in catena di polimerasi digitale (dPCR), PCR digitale BEAMing, Sistema di Mutazione Refrattaria di Amplificazione-PCR, Capp-Seq è Tam-Seq sò assai sensibili à i geni predefiniti.I metudi off-target, cum'è a sequenza di genoma sanu è NGS furnisce una vista cumpleta di tuttu u paisaghju genomicu.44 Paragunatu à i pannelli di destinazione, a sequenza di genoma sanu pò detectà micca solu mutazioni puntuali è inserimenti, ma ancu riarrangiamenti è variazioni di u numeru di copie.prognosis, è CTC è cfDNA sò boni indicatori chì ponu esse utilizati per a monitorizazione dinamica di HCC.45 Inoltre, l'analisi cfDNA pò esse più utile per a deteczione di HCC.Yan et al.hà dimustratu chì cfDNA in u plasma di i malati cù HCC era significativamente più altu ch'è in i malati cù fibrosi liver è cuntrolli sani.Comparatu à l'AFP, ctDNA hè prevista per esse un marcatore di screening megliu per l'HCC precoce.46 In un studiu pruspettivu di 47 biopsie di liquidu chì anu pruvatu cfDNA è a proteina in una populazione di a pupulazione, sò stati dimustrati per esse efficaci à differenzià i pazienti cun HCC da i pazienti senza HCC.In un seguitu di 331 ultrasound nurmali è pazienti AFP-negativi, a sensibilità è a specificità di cfDNA per diagnosticà HCC eranu 100% è 94%, rispettivamente, cusì cDNA puderia detect HCC in individui seropositivi HBsAg asimptomatici.In u studiu Yeo48, una freccia alta (92.5%) di ipermetilazione di u promotore RASSF1A hè stata trovata in i malati cù HCC.Inoltre, Xu et al.criatu un mudellu di diagnosticu per predice HCC utilizendu un pannellu di marcatori di metilazione specifichi cù una specificità è una sensibilità di 90,5% è 83,3%, rispettivamente.U pannellu permette à i pazienti cun HCC per esse distinti da i malati cù altre malatie di u fegatu, chì hè megliu cà AFP.Anu ancu truvatu chì i cuntrolli normali chì anu pruvatu pusitivu pò avè fatturi di risichi per l'HCC, cum'è l'infezione da HBV o una storia di usu d'alcohol.25 Ipotisemu chì i fatturi d'altu risicu per l'HCC ponu prumove l'ipermetilazione di cfDNA, chì cuntribuisce dopu à a progressione di l'HCC, è cusì cfDNA pò ghjucà un rolu chjave in u screening per i gruppi d'altu risicu.Cai et al.riassume a gamma completa di mutazioni ctDNA è offre una strategia robusta per valutà a carica di tumore in i pazienti.49 Questa strategia pò identificà a tumorigenesi una mediana di 4,6 mesi prima di u cambiamentu di l'imaghjini è hà dimustratu un rendimentu diagnosticu superiore in comparazione cù i biomarcatori di serum AFP, AFP-L3 è PIVKA-II.U valore diagnosticu di a prova di cDNA hè statu dimustratu quandu a valutazione di l'imaghjini ùn hè micca dispunibule, cusì a prova di cDNA hè di valore in u diagnosticu di l'HCC precoce in i gruppi d'altu risicu.Ricertamenti, i scientisti anu utilizatu a tecnulugia NGS per analizà l'indicatori di variazioni genetiche multivariate (cumprese 5-hydroxymethylcytosine, 5′-motif, fragmentation, nucleosome trace, HIFI) in 3204 campioni clinichi è cfDNA.50 Modelli HIFI ri-validati cù trè treni indipendenti, teste è setti di teste dimustranu una discriminazione stabile è affidabile trà e pupulazioni HCC è non-HCC cù una sensibilità di 95,79% è 95,42% in teste è teste specifiche di HCC, rispettivamente.I sessi eranu 95,00% è 97,83%, rispettivamente.U valore diagnosticu di u metu HIFI hè più altu ch'è quellu di l'AFP per distingue HCC da cirrhose.Inoltre, ctDNA hè ancu utilizatu in trattamentu kirurggicu.Atsushi et al.determinatu i livelli di serum preoperatori di ctDNA in i malati cù HCC è truvaru chì a freccia di recurrenza è a rata di metastasi extrahepatic in u gruppu cDNA pusitivu eranu significativamente più altu ch'è in u gruppu cDNA negativu, è i livelli di cDNA eranu significativamente correlati.cù a progressione di tumore.51 Essendu un biomarcatore altamente sensibile, ctDNA pò predice a capacità di HCC per invadisce i navi.Wang et al.hà realizatu a sequenza di u genoma sanu di 46 pazienti cù HCC, è l'analisi multivariate hà dimustratu chì u valore di u limitu di a freccia allele di a variante cDNA per l'invasione in i microvessels hè 0.83%, a sensibilità 89.7% è a specificità 80.0%.un fattore di risicu indipendente per l'invasione microvascular in HCC resecable, chì suggerenu chì cDNA pò aiutà à guidà u trattamentu ottimali.In cunclusione, ctDNA hè cumplettamente implicatu in l'occurrence è u sviluppu di HCC è pò esse usatu per screening precoce, valutazione chirurgica è monitoraghju di a malatia.
I CTC sò cellule maligne derivate da tumori primari o metastasi chì metastasize à u sangue.E cellule tumorali secrete metalloproteinasi di matrice (MMP), chì rompenu a membrana basale, permettenu à e cellule tumorali di entra direttamente in i vini sanguini è linfatici.In ogni casu, a maiò parte di i CTC sò rapidamente eliminati da anoikis, attaccu immune, o stress di taglio.53 A transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) permette à i CTC di esse facilmente isolati da u tessulu tumorale primariu, invade i capillari, è acquistà una sopravvivenza significativamente mejorata, metastasi, invasività è resistenza à a droga.I studii anu dimustratu chì ci hè una profonda eterogeneità trà e diverse cellule tumorali in i tumori metastatici primari.Cusì, l'analisi CTC pò purtà à una comprensione cumpleta di l'eterogeneità di e cellule tumorali.54
I marcatori specifichi per i CTC associati à l'HCC includenu glypican-3 (GPC3), receptore asialoglycoprotein (ASGPR), molécula di adesione di cellule epiteliali (EpCAM) è marcatori associati à e cellule staminali cum'è CD44, CD90, 55 è a molécula di adesione intercellulare 1 (ICAM1).) .56 U marcatore GPC3 hè una proteina ancorata à a membrana cellulare chì hè clinicamente utilizata per l'analisi patologica è a carattarizazione di HCC.57 L'espressione di GPC3 hè più cumuni in e cellule tumorali HCC cù differenziazione intermedia è bassa è prumove a migrazione extrahepatic;in più, a prisenza di GPC3 + ​​CTC indica metastatic HCC.58 ASGPR hè una proteina transmembrana espressa solu nantu à a superficia di l'hepatocytes è hè assai espressa in HCC ben differenziatu.EpCAM hè una di e proteine ​​​​associate à a membrana più comunemente usate per catturà CTC.EpCAM hè statu identificatu cum'è un marcatore di superficia di cellule HCC cù caratteristiche di cellule staminali, 59 chì correlate cù diverse caratteristiche clinicopatologiche di HCC, cum'è l'invasione vascular, i livelli di AFP valutati è u stadiu avanzatu di u cancru di u fegatu à l'Hospital di Barcelona (BCLC).U fenotipu 60 CTC EMT hè altamente metastaticu.54 prucessi EMT in u CTC prumove metastasi HCC.L'espressione di marcatori EMT cum'è vimentin, twist, E-box zinc finger binding (ZEB) 1, ZEB2, snail, slug, è E-cadherin sò stati studiati in CTC derivati ​​da u fegatu da i pazienti HCC.58 U sistema CanPatrol™ sviluppatu da Cheng [61] hà classificatu i CTC in trè sottogruppi fenotipichi basati nantu à marcatori principarmenti espressi: fenotipu epiteliale (EpCAM, CK8/18/19), fenotipu mesenchymal (vimentin, coiled) è fenotipi misti.In 176 pazienti, u CTC tutale era superiore à l'AFP in a differenziazione di HCC da a malatia hepatica benigna.I valori AUC per CTC totale, AFP, è CTC totale cumminatu è AFP eranu 0,774 (IC 95%, 0,704-0,834), 0,669 (IC 95%, 0,587-0,750) è 0,821 (IC 95%, 0,756-0,834). ).), rispettivamente.A classificazione CTC basata nantu à EMT pò predice u diagnosticu di HCC, a recurrenza precoce, metastasi è u tempu generale più breve.
Attualmente, i metudi per a rilevazione di CSC includenu metudi fisichi è metudi biologichi.I metudi fisichi, spessu referiti à l'arricchimentu basatu nantu à e proprietà biofisiche, dependenu principalmente di e proprietà fisiche di u CSC, cum'è a dimensione, a densità, a carica, a mobilità è a deformabilità.Sicondu e proprietà fisiche, ci sò parechji metudi cum'è sistemi basati in filtrazione, dielettroforesi, etc. L'ultime, cunnisciuta ancu com'è arricchimentu basatu in immunoaffinità, hè principalmente basatu annantu à l'antigenu-anticorpu, postu chì u metudu usa anticorpi contr'à biomarcatori specifichi di tumore. cum'è EpCAM, ASGPR, u receptore 2 di u fattore di crescita epidermica umana (HER2), l'antigene specificu di a prostata (PSA), a pancytokeratina umana (P-CK) è a carbamoyl phosphate synthase 1 (CPS1).62 Un altru tipu, chjamatu u metudu senza arricchimentu, usa a citometria di flussu per differenzià i CTC da i leucociti basatu annantu à un rapportu nucleare à citoplasma più altu è dimensione.Attualmente, l'unicu test appruvatu da a FDA per a rilevazione di CTC hè u sistema Cell-Search™, chì usa u marcatore di a superficia cellulare EpCAM. In ogni casu, a rilevazione di CTC basata in marcatori cumminati puderia aumentà a rata di positività.54 Una mistura di anticorpi contr'à ASGPR è CPS1 hà ottinutu una rata di deteczione CTC di 91% in pazienti HCC.63 Zhang et al anu utilizatu un CTC-Chip cù anticorpi contra ASGPR, P. -CK è CPS1, è hà differenziatu i pazienti HCC da quelli cù malatie benigna di fegato o cancro non-HCC à un ritmu di 100%. 64 Un studiu di Wang hà rilevatu EpCAM + CTC in 60% di 42 pazienti HCC è truvaru correlazioni significativa trà i dui positività. è u numeru di CTC cù stadiu TNM.65 Guo et al anu truvatu chì un puntu PCR derivatu da CTC hè statu elevatu in 125/171 (73%) pazienti chì u nivellu di AFP era <20 ng/mL cù una sensibilità di 72,5% è un specificità di 95,0%, cumparatu cù 57,0% è 90,0% per AFP à un cutoff 20 ng/mL.66 A cumminazzioni di AFP è CTC pò migliurà a deteczione di HCC.45 Hè cresce chì i CTC anu un vantaghju annantu à l'AFP in u screening precoce di gruppi. à altu risicu per HCC. In ogni casu, a rilevazione di CTC basata in marcatori cumminati puderia aumentà a rata di positività.54 Una mistura di anticorpi contr'à ASGPR è CPS1 hà ottinutu una rata di deteczione CTC di 91% in pazienti HCC.63 Zhang et al anu utilizatu un CTC-Chip cù anticorpi contra ASGPR, P. -CK è CPS1, è hà differenziatu i pazienti HCC da quelli cù malatie benigna di fegato o cancro non-HCC à un ritmu di 100%. 64 Un studiu di Wang hà rilevatu EpCAM + CTC in 60% di 42 pazienti HCC è truvaru correlazioni significativa trà i dui positività. è u numeru di CTC cù stadiu TNM.65 Guo et al anu truvatu chì un puntu PCR derivatu da CTC hè statu elevatu in 125/171 (73%) pazienti chì u nivellu di AFP era <20 ng/mL cù una sensibilità di 72,5% è un specificità di 95,0%, cumparatu cù 57,0% è 90,0% per AFP à un cutoff 20 ng/mL.66 A cumminazzioni di AFP è CTC pò migliurà a deteczione di HCC.45 Hè cresce chì i CTC anu un vantaghju annantu à l'AFP in u screening precoce di gruppi. à risicu altu per HCC.In ogni casu, a rilevazione cumminata di CTC basata in marcatura pò aumentà u percentualità di risultati pusitivi.54 Una mistura di anticorpi anti-ASGPR è CPS1 hà ottinutu una rata di deteczione CTC di 91% in i malati cù HCC.63 Zhang et al.hà utilizatu un CTC-Chip cù anticorpi contr'à ASGPR, P-CK è CPS1, è ancu distinguì i malati cù HCC da quelli cù malatie liver benigna o non-HCC à una tarifa di 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. frequenza è numeru di CTC cù stadiu TNM.65 Guo et al truvaru chì a PCR derivata da CTC hè stata elevata in 125/171 (73%) pazienti chì avianu livelli AFP <20 ng/mL cù una sensibilità di 72,5% è una specificità di 95.0% cumparatu à 57.0% è 90.0% per AFP à un livellu di cut-off di 20 ng/mL.66 A cumminazzioni di AFP è CTC pò migliurà a deteczione di HCC.45 CTCs sò cunsiderate avè un vantaghju annantu à AFP in screening precoce. gruppi.cù un altu risicu di HCC.Tuttavia, a rilevazione cumminata basata in marcatori di CTC pò aumentà u percentuale di risultati pusitivi.54 Una mistura di l'anticorpi anti-ASGPR è CPS1 hà ottinutu un 91% di deteczione di CTC in i malati cù HCC.63 Zhang et al.utilizatu chips CTC cù anticorpi contr'à ASGPR, P-CK è CPS1 è distinguì i pazienti cù HCC da a malatia di fegatu benigna è non-HCC cun 100%.64 U studiu di Wang hà identificatu u 60% di EpCAM + CTC in 42 pazienti HCC è hà truvatu una correlazione significativa trà l'incidenza è u numeru di CTC in u stadiu TNM. 65 Guo 等 人 人 人, 在 Afp 水 的 121/171 (73%, 特异性特异性 75.5%, 特异性 分 95.0%, 而 ASP 在 截止值为20 ng/mL 时的特异性为57,0% 和90,0%. 65 Guo 等 等 在 在 ♥ 在i 水 ♥ 在 在 水水 72.5/10: 分 95.0 截止 截止 截止 分 截止 截止截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 20g / ML 时 的 特异性 $% 和 90%.65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. truvaru chì in 125/171 (73%) pazienti cun livelli di AFP <20 ng/mL, i valori PCR derivati ​​da CTC sò stati elevati cù una sensibilità di 72,5% è una specificità di 95,0%, mentre chì l'AFP era in cut-off specificity. era 20 ng/mL.ml era 57,0% è 90,0%.66 A cumminazzioni di ORP è CTC migliurà a deteczione di HCC.45 CTC sò pensati per esse superiore à l'AFP in u screening precoce di pupulazioni HCC à altu risicu.Cusì, per i gruppi di HCC CTC-positivi è d'altu risicu, a prova CTC deve esse cumminata rutinariamente cù ultrasound è rilevazione AFP.In ogni casu, i CTC sò cunsiderate predittori impurtanti di metastasi tumorale è recurrence, è a deteczione di CTC ùn hè micca indipindente cum'è strumentu di diagnosticu.62 Dunque, CTC pò serve cum'è un biomarcatore predittivu megliu cà l'altri marcatori attualmente usati. Zhou et al truvaru chì i pazienti cù un numeru elevatu di CTC EpCAM + è e cellule T regulatori mostranu un risicu più altu di sviluppà a recurrenza di HCC, cà quelli chì anu un numeru bassu di CTC, cun un rapportu di recurrenza di 66.7% vs 10.3% (P <0.001).67 Un studiu simili hè statu informatu da Zhong et al.68 Inoltre, Qi hà truvatu chì 101 di 112 pazienti (90,81%) cù HCC, cumpresi quelli cù a malatia di u stadiu iniziale, eranu pusitivi per CTC è chì i noduli HCC assai chjuchi sò stati rilevati dopu à 3. à 5 mesi di seguitu. Zhou et al anu truvatu chì i pazienti cù un numeru elevatu di CTC EpCAM + è e cellule T regulatori mostranu un risicu più altu di sviluppà a recurrenza di l'HCC cà quelli chì anu un numeru bassu di CTC, cun un rapportu di recurrenza di 66.7% vs 10.3% (P <0.001).67 A. studiu simili hè statu informatu da Zhong et al.68 In più, Qi hà trovu chì 101 di 112 pazienti (90,81%) cù HCC, cumpresi quelli cù a malatia in prima fase, eranu pusitivi per CTC è chì i noduli HCC assai chjuchi sò stati rilevati dopu à 3 à. 5 mesi di seguitu. Чжоу è др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al anu truvatu chì i malati cù CTC elevati EpCAM + è e cellule T regulatori anu un risicu più altu di recurrenza di HCC cà quelli chì anu CTCs bassu, cù una freccia di recurrenza di 66.7% vs 10.3% (P <0.001)67.Un studiu simili hè statu realizatu da Zhong et al.68. Inoltre, Qi hà truvatu chì 101 da 112 pazienti (90,81%) cù HCC, cumpresi quelli chì anu a malatia precoce, avianu CTC, è chì i noduli HCC assai chjuchi sò stati rilevati dopu à 3 à 5 mesi di seguitu. Zhou 等等 人 发现 较 少 的 患者 少 的 患者 少 的 患者 少 少 调节性 细胞 细胞 数量 和, 复发率 分别分别 66.7% 和 06.7%: p <0,3%). Zhou 等 人 发现 与 与 ctc 数量 少 的 患者 相比 ， epcam+ ctc 和 t 细胞 数量 的 患者 发生 hcc 复发 风险 更 ， 复发率 分别 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 10.3% ( p <0.001)。。。。。。。。。。。。。。。 Чжоу è др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou et al.truvaru chì i malati cù CTC elevati di EpCAM + è i celluli T regulatori anu un risicu più altu di recurrenza di HCC cumparatu cù i malati cù menu CTCs, cù tassi di recurrenza di 66.7% è 10.3%, rispettivamente (P <0.001).Un studiu simili hè statu informatu da Zhong et al.68 Inoltre, Qi hà truvatu chì 101 di 112 pazienti HCC (90.81%), cumpresi i malati cù a malatia precoce, avianu risultati CTC pusitivi è truvaru noduli HCC assai chjuchi dopu à 3 visite.Osservazione finu à 5 mesi.Anu ancu trovu CTC in 12 pazienti cù infezione cronica di HBV è truvaru picculi tumori HCC in 5 mesi in 2 pazienti CTC-positivi.69 Cusì, i CTC ponu esse aduprati per predichendu l'HCC, 70 ma ponu esse aduprati più rutinariamente cum'è biomarcatori predittivi.
Cum'è cfDNA, cfRNA hè liberatu in u sangue attraversu diversi sistemi.Queste molécule in u sangue perifèricu rapprisentanu u tissutu cancerosu d'origine.Comparatu à i marcatori rilevati da i metudi non invasivi, i cfRNAs sò più regulati dinamicamente, specifichi di u tissutu, è abbundanti in l'ambiente extracellulare.U significatu è u valore diagnosticu di 71 miRNAs (miRNAs) in HCC hè statu infurmatu in parechji studii.I miRNA sò RNA endogeni non codificanti (ncRNAs) chì regulanu diverse attività biologiche molecolari inibendu a traduzzione di RNAs messenger target (mRNA).I miRNA sò situati in corpi apoptotichi incapsulati in esosomi, ma ponu ancu unisce in modu stabile à i proteini di u serum è i lipidi in u sangue perifericu è ponu esse usatu per evaluà HCC.I microRNA sò implicati in a regenerazione di u fegatu, u metabolismu di lipidi, l'apoptosi, l'infiammazione è u sviluppu di HCC.72 I miRNA oncogeni cum'è miR-21, miR-155 è miR-221 sò ben cunnisciuti in HCC.In particulare, miR-21 ghjoca un rolu chjave in a sintesi di collagenu in a matrice extracellulare è a fibrosi è prumove l'hepatocarcinogenesis attivendu e cellule staminali hematopoietic.72,73 I miRNA suppressori di tumore in HCC includenu miRNA-122, miRNA-29, a famiglia Let-7 è a famiglia miRNA-15.A famiglia Let-7 hè custituita da parechji miRNAs suppressori di tumore chì miranu à a famiglia RAS.A famiglia miR-15 include miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 è miR-497, chì anu sequenze cumplementarii per certi mRNA.Inoltre, l'RNA longhi non codificanti (lncRNAs) è l'RNA circulari (cirRNAs) sò ancu impurtanti per u screening precoce di HCC.LncRNAs rapprisentanu a classa più larga di ncRNAs, cumprese ncRNA simili à mRNA, è sò implicati in a patogenesi di parechje malatie umane.LncRNAs ghjucanu un rolu regulatore in u microambientu di u fegatu è a malatia di u fegatu cronica.74 CircRNAs sò ancu una classa di ncRNA cù funzioni multiple in a regulazione di l'espressione genica.Ricertamenti, i circRNAs sò stati cunsiderati cum'è strumenti di diagnostichi per HCC.
L'ARN libre circulante hà una stabilità notevule, cumpresa a resistenza à a temperatura, u pH è a RNase, chì rende l'isolazione di fnRNA da u sangue perifèricu menu tediosa cù i metudi standard di purificazione di RNA.I metudi più cumunimenti utilizati includenu NGS, microarray è RT-qPCR.NGS permette à i microRNAs per esse misurati in tuttu u genoma.Tuttavia, stu metudu hè caru è l'analisi ùn hè micca standardizata.In cuntrastu, RT-qPCR hè pocu costu, amplifica rapidamente l'acidi nucleici, è offre assai vantaghji cum'è una sensibilità più alta, una precisione più alta, una gamma dinamica più larga, è esige menu campioni.I microarrays sò un altru mètudu utilizatu per a rilevazione di miRNA basatu nantu à l'ibridazione sensitiva è specifica di i miRNA di destinazione cù sonde di DNA cumplementarii, 75 ma l'analisi di dati di microarray richiede tempu.
Circulating miR-122 è Let-7 sò stati rappurtati per esse potenzalmentu utile in u diagnosticu di l'HCC in u stadiu iniziale in i gruppi d'altu risicu, i marcatori in i malati cù noduli premaligni associati à l'HBV è l'HCC in u stadiu iniziale.76 Cai et al.hà trovu chì i membri di a famiglia Let-7 (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126, è miR-199a/b) sò in risicu di cronica. HCC in i malati cù l'hepatitis.A famiglia Let-7 pò serve com'è un biomarcatore surrogatu efficace per predice u sviluppu di HCC in i gruppi d'altu risicu assuciatu cù l'hepatitis C crònica. 77 miR-122 hà una alta precisione di diagnostica in a deteczione di HCC precoce in i malati cù cirrhosis liver.78 Serum circulating MiR-107 hè statu ancu evaluatu in i primi stadi di HCC, 79 è hà dimustratu un bonu putenziale in populazioni à altu risicu.Zhou et al hà dettu chì un pannellu di miRNAs (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a è miR-801) pò differenzià HCC da l'epatite B cronica (CHB) è a cirrosi. a sensibilità era 79.1% è 75%, è specificità 76.4% è 91.1%, rispettivamente.80 In l'HCC HBV-related, avemu trovu chì i livelli di miR150 sò significativamente ridotti cumparatu cù quelli in i pazienti HBV cronichi senza HCC (sensibilità 79.1%, specificità 76.5%).-224 hè statu elevatu in HCC cumparatu cù cuntrolli sani, è l'analisi di sottogruppu dimustranu livelli più altu in i malati cù HCC assuciatu à HBV.A cirrosi associata à l'hepatitis B è i pazienti HCC anu identificatu un classificatore siRNA chì cuntene sette siRNA espressi di manera differenziale chì ponu detect HCC in diversi cuntrolli;A gamma AUC à u screening precoce hè megliu cà i vuluntarii AFP.Anu trovu chì quattru miRNA (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p, è miR-365a-3p) puderanu distingue i pazienti cun HCC da i pazienti senza HCC.Cinque miRNA sovraespressivi (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p è miR-148a-3p) sò cunsiderate potenziali infezioni HBV in HCC, cirrosi è biomarcatori CHB, in particulare. miR-34a-5p pò esse biomarcatori per a cirrosi hepatica,85 è pò esse biomarcatori potenziali per u screening precoce di HCC in pupulazioni d'altu risicu.U lncRNA più studiatu in HCC hè assai attivatu in u cancer di u fegatu (HULC).Altri studii anu dimustratu chì HULC chì circula in i pazienti HCC pò esse usatu cum'è un marcatore di diagnosticu perchè stu lncRNA hè assai upregulated in i pazienti HCC cumparatu cù individui sani.71,86 Frà altri lnRNAs, LINC00152 hè cunsideratu u megliu lncRNA diagnosticu per via di a so alta AUC, sensibilità è specificità.86 In un studiu, l'espressione di sangue perifericu di LINC00152 aumentò gradualmente da i cuntrolli sani normali à i pazienti cù CHB è cirrosi, è infine era più altu in HCC.Studii di l'espressione di circSMARCA5 in u plasma di i malati cù HCC anu dimustratu una diminuzione progressiva di l'espressione in HCC chì varieghja da l'hepatitis à cirrhosis è e lesioni precancerous.87 L'analisi di e curve ROC hà cunfirmatu u putenziale di questi circRNAs in distinguish patients with hepatitis o cirrhosis liver da quelli cù HCC, in particulare quelli cù livelli AFP sottu 200 ng/mL.Inoltre, Zhu analizò 13,617 RNA ciclichi in campioni di plasma da i pazienti HCC associati à HBV è cunfirmò chì 6 RNA ciclichi sò stati spressi in modu diversu in HCC è cirrosi associata à HBV, suggerendu chì i cRNA pò esse benefica.marcatori per a screening precoce di i gruppi d'altu risicu, cum'è quelli assuciati à a malatia di u fegatu, i malati di sclerosi.88
L'esosomi sò vesiculi di membrana di 40-160 nm di diametru;parechje vesiculi intracellulari fusionanu cù a membrana cellulare è sò liberati in a matrice extracellulare.Contenenu assai cumpunenti attivi, cumpresi lipidi, proteini, RNA è DNA, è ghjucanu un rolu chjave in a cumunicazione trà e cellule, sia cellule HCC sia non-HCC.89,90 L'esosomi regulanu a progressione di l'HCC attivendu i fibroblasti di epatociti è e cellule stellate, e cellule immunitarie, epatociti normali è e cellule HCC.91 In u microambientu di u tumore, e cellule tumorali pruducenu un gran numaru d'esosomi chì sò purtati da e cellule cancerose à e cellule immature, chì à u turnu sò implicati in l'oncogenesi, a degradazione è a signalazione cellulare.92 I studii anu dimustratu chì l'esosomi ponu trasfiriri l'oncogenes à e cellule normali durante i prucessi patologichi, chì pò esse unu di i miccanismi di l'invasione di tumore è metastasi.93 U rolu di l'esosomi in a progressione di u cancer pò esse dinamicu è specificu à u tipu di cancru, 89 L'esosomi ponu esse internalizzati da e cellule adiacenti o distanti per regulà parechji geni di destinazione in cellule destinatarie chì ponu esse implicati in ioni di cumunicazione intercellulare è interazzioni di u microambientu cellulare. mediate a signalazione cellulare è u metabolismu.94 E caratteristiche è i cambiamenti dinamichi di e molécule di carica esosomi riflettenu direttamente e caratteristiche è i cambiamenti dinamichi di e cellule tumorali parentali,95 chì hè ancu a basa per l'usu di l'esosomi in u diagnosticu è u pronostico di u cancer, è ancu per predichendu a risposta individuale à a terapia anticancro. ..96
I metudi tradiziunali di laboratoriu per l'isolamentu è l'analisi di l'esosomi sò cumplessi, multi-step, è di tempu, cumprese ultracentrifugazione, filtrazione, cromatografia di esclusione di taglia, purificazione immunoaffinità, Western blotting, analisi immunosorbente enzimatica (ELISA), PCR è analisi di flussu.Sistemi miniaturizzati è piattaforme lab-on-a-chip chì utilizanu micro/nanotecnologia sò largamente sviluppati per un isolamentu in situ rapidu è convenientu di esosomi.L'analisi di seguimentu di nanoparticule (NTA) hè un metudu largamente utilizatu per caratterizà a dimensione è a cuncentrazione di l'esosomi, cumprese metudi cum'è nanoparticelle magnetiche è poliidrossialcanoati.I metudi microfluidichi è elettrochimichi ponu ancu detectà rapidamente l'esosomi in alti rendimenti.
E proteine ​​​​esosomali sò marcatori impurtanti per u diagnosticu di HCC.In u studiu di Arbelaiz, u nivellu di 98 RasGAP SH3 binding protein (G3BP) è u receptore polimericu di immunoglobuline (PIGR) era significativamente elevatu in l'esosomi derivati ​​da HCC, è l'efficacità cumminata putativa di e duie proteine ​​​​era superiore à quella di AFP.A sobrecarga di ferru hè un fattore impurtante chì cuntribuisce à u sviluppu di HCC.Tseng hà dettu chì l'hepcidin pò ghjucà un rolu chjave in a resistenza à HCC.99 L'esosomi derivati ​​da i sieri di i pazienti HCC anu avutu un numeru di copie significativamente più altu di varianti di mRNA di hepcidin cà i so omologhi sani, suggerendu chì l'hepcidin pò esse un novu biomarcatore diagnosticu per HCC.A proteina 14-3-3ζ in l'esosomi pruduciuti da 100 HCC pò riduce l'attivazione, a proliferazione è a differenziazione di e cellule T è pò induce a trasfurmazioni di e cellule T in cellule T regulatorie, risultatu in a deplezione di e cellule T.101 Questu hè sustinutu da parechji studii chì investiganu l'evasione di u tumore da a surviglianza immune, 102 chì pò cuntribuisce à a tumorigenesi di HCC.
In più di a presenza di ecRNA in plasma o serum, l'esosomi arricchiti di RNA ponu esse aduprati per staging non invasive in tempu reale in u screening di tumore precoce è per determinà l'evoluzione di u tumore è a risposta à a terapia.U nivellu di miRNA-21 exosomal in u serum di sangue in u gruppu HCC era 2.21 volte più altu ch'è in u gruppu CHB, è in u gruppu HCC era 5.57 volte più altu ch'è in a populazione sana.In u studiu di Wang, l'esosomi anu aumentatu significativamente l'HCC cumparatu cù i pazienti cirrosi cù valori AUC di 0,83 (95% CI 0,74-0,93) è 0,94 (95% CI 0,88-1,00).104 I dati ottenuti dilucidavanu l'implicazione di molécule di carica exosomali specifiche in a regulazione di l'oncogenesi è a progressione di HCC.105 L'espressione serica di miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 è miR-26a hè coerente.è metastasi, è i livelli di miR21 eranu assai più altu in i malati HCC chì in i cuntrolli sani è ancu in i pazienti CHB.102 LncRNA hà avutu un valore di diagnosticu potenziale in HCC.I studii anu dimustratu chì l'esosomi derivati ​​da i serii di i pazienti HCC anu livelli significativamente più alti di LINC00161, LINC000635, è lncRNA attivatu da trasfurmà u factor di crescita-β chì in i pazienti senza HCC, è questi lncRNA sò assai assuciati cù u stadiu TNM è u voluminu di tumore.110 Conigliaro et al.L'esosomi CD90+ sò stati trovati per sprime livelli elevati di lncRNAH19, chì anu aumentatu significativamente a liberazione di u fattore di crescita endoteliale vascular (VEGF) è a produzzione di u receptore VEGF-R1, stimulendu cusì l'angiogenesi.93 I CircRNAs sò un altru tipu di ncRNA esosomiali - espressi à livelli più bassi ma stabili in tutte e spezie, i circRNAs mostranu ancu specificità per u tipu di cellula, u tipu di tissutu, u stadiu di sviluppu è l'attività regulatoria.111 circRNA sò biomarcatori diagnostichi per u cancer precoce è minimamente invasivo.112 I prucessi clinichi recenti anu dimustratu chì a specificità di i miRNA individuali in a prediczione di HCC ùn hè micca ideale.Dunque, a rilevazione cumplessa utilizendu assai saggi (per esempiu, miR-122 è miR-48a in cumbinazione cù AFP) pò migliurà l'identificazione di HCC precoce è a differenziazione di HCC da cirrhosis.100
I Pacienti cù CHB è cirrhosis liver sò u gruppu d'altu risicu più cumuni per u sviluppu di HCC.Per i gruppi d'altu risicu, una volta chì una risposta virologica sustinuta hè stata ottenuta, una strategia di surviglianza rentabile basata nantu à u risicu di HCC deve esse sviluppata, è u screening precoce hè a chjave per migliurà u diagnosticu è u trattamentu di HCC cun un altu rapportu di costu-efficacità2. ..I metudi di screening precoce per u cancer anu parechje limitazioni: i metudi di screening precoce efficace ùn sò micca stati sviluppati per a maiò parte di i tipi di cancru, è l'aderenza hè generalmente bassa.Paragunatu à i metudi tradiziunali di screening iniziale, a tecnulugia di biopsia liquida hà vantaghji evidenti: facilità di campionamentu, rilevazione di panrac, bona riproducibilità di mostra, è risposta efficace à l'eterogeneità di u tumore.Data l'efficacità di u costu di i metudi assuciati à a biòpsia di liquidu, u so usu in u screening HCC ùn hè micca statu pruvatu in rutina.Malgradu l'avanzati in a rilevazione precisa à u livellu molekulari, a biòpsia di fluidu hè caru per detectà l'HCC in i pazienti di destinazione, limitendu u so usu generalizatu cumparatu cù prucessi di imaging specifichi cum'è l'ultrasound è l'imaghjini di risonanza magnetica.113,114 In ogni casu, un studiu precedente hà dimustratu chì a biòpsia di liquidu hà dimustratu un benefiziu significativu in termini di anni di vita di qualità (QALY).115 I benefizii di a biòpsia liquida in u carcinoma precoce di u stomacu è a nasofaringe sò stati ancu dimustrati.116,117 A vista attuale hè chì a biòpsia liquida pò cumplementà i biomarcatori di serum è u screening radiologicu in a deteczione è u diagnosticu di tumuri.117 118
Sicondu a literatura attuale, a tecnulugia di biopsia fluida hà dimustratu sensibilità è specificità significativamente più altu in a screening precoce di i gruppi à risicu altu per u cancru di fegatu.Indipendentemente da u tipu di biòpsia di fluidu, pò distingue l'HCC da l'individui d'altu risicu senza HCC, chì suggerenu l'impurtanza di screening precoce cum'è e differenze trà l'individui d'altu risicu è sani sò evidenti.ctDNA hà una mezza vita corta è pò esse usata per detectà l'HCC, cusì ogni cambiamentu in u cDNA derivatu da u tumore pò furnisce evidenza concreta in tempu reale di a progressione di tumore, in particulare per i picculi tumuri.Un altu livellu di ctDNA indica u sviluppu è a diffusione di u cancer è hè un indicatore precoce di progressione è recurrenza.Inoltre, basatu nantu à i risultati di ctDNA, i pazienti ponu riceve trattamentu individualizatu è seguitu.119 I siti di metilazione specifichi ponu esse un marcatore megliu cà l'AFP per l'identificazione precoce di HCC è noduli cirrosi.In i casi resecable di HCC, alti livelli di cDNA sò indicativi di invasione microvascular è recidiva postoperatoria è metastasi.I cambiamenti in u numeru di copie sò assuciati cù a sopravvivenza di i pazienti cun HCC.Pò esse presumitu chì a valutazione di cDNA pò esse implicata in u trattamentu generale di HCC, è cDNA pò serve com'è un indicatore efficace di modulazione terapeutica.I marcatori basati nantu à mutazioni genetiche specifiche in ctDNA sò stati aduttati da linee cliniche per predice l'efficacità è monitorà a resistenza di droga.A prova di ctDNA pò esse u strumentu di biopsia liquida più utile per a screening precoce.I CTC ghjucanu ancu un rolu chjave in u screening precoce di i gruppi HCC d'altu risicu.Diversi marcatori di CTC associati à HCC sò d'impurtanza particulari in l'iniziu, u sviluppu è a recurrenza di HCC.Cum'è vesiculi di a membrana, l'esosomi sò implicati in a cumunicazione intercellulare, in particulare in e cellule HCC.I microRNA circulanti sò stabili in u sangue è cusì ponu esse più utili per a screening precoce di HCC.Gradualmente, i proteini esosomali è l'esosomi ricchi di RNA sò stati scuperti, è a so efficacità predittiva per HCC hè stata cunfirmata.Curiosamente, diverse etiologie di HCC ponu ancu esse assuciate cù diverse mutazioni, cusì pudemu selezziunà diversi biomarcatori per screening precoce basatu annantu à diverse etiologie di HCC.120
Tuttavia, i tecnichi attuali di biopsia di fluidi sò discutibili in termini di stabilità è ùn ponu micca esse realizatu indipindentamente screening precoce o monitoraghju di HCC, ma ponu ancu cumplementà a screening individuale è u diagnosticu.121 Cum'è una forma di biòpsia liquida, a rilevazione è l'imaghjini di ctDNA, CTC, cfRNA è AFP associata à l'esosomi o PIVKA-II anu applicazioni promettenti in u diagnosticu precoce è u pronostico di HCC.Tuttavia, u mecanismu esatta di liberazione di ctDNA in u sangue resta à esse elucidatu.Revelà e proprietà biologiche basiche di ctDNA pò facilità u so usu cum'è marcatore.A piccula quantità di ctDNA in a circulazione è i stretti requisiti di manipulazione di campioni sò sfide per l'implementazione clinica di a rilevazione di cDNA in HCC.Inoltre, i mutazioni genetichi ùn anu micca caratteristiche specifiche chì permettenu l'identificazione precisa di i carcinogeni.Siccomu parechje varianti genetichi è somatichi sò ancu prisenti in i tessuti normali, mutazioni genetiche identificate da a biòpsia di fluidu pò esse di utilità limitata in a screening precoce per HCC.122 E limitazioni di target di geni utili ben definiti è biomarcatori chì aiutanu à differenzià cDNA da DNA non-tumorale sò i prublemi più impurtanti in l'usu di cDNA.mancanza di utilità di marcatori sensitivi è specifichi per a deteczione di CTC.Solu e cellule viabili cù putenziali metastatici sò stati trovati, è a cumminazione ottima di marcatori arricchiti CSC ùn era micca chjaru.L'isolamentu di i CTC per a cultura è a valutazione di i so profili di mutazione hè ancu un compitu sfida.A causa di prublemi cù l'identificazione, l'isolamentu è a purificazione di l'esosomi, u mecanismu moleculare specificu ùn hè ancu chjaru, è i studii precedenti nantu à u mecanismu di l'esosomi è l'HCC ùn sò micca stati in prufundità, è a manera chì i miRNAs, lncRNAs, è e proteini sò classificati in esosomi. , è ùn hè micca chjaru se l'assunzione di l'esosomi hè un prucessu di tipu specificu.L'usu di l'esosomi per u diagnosticu è u trattamentu di HCC hè sempre in u stadiu preclinicu.A mancanza di standardizazione di e prucedure di biopsia di liquidu, cum'è u tipu di tubi utilizati per cullà u sangue, u voluminu di sangue, l'almacenamiento di campioni è a rilevazione, l'isolamentu è l'arricchimentu, ponu impedisce u so usu in a pratica clinica di rutina per via di e differenze di pratiche in i centri medichi.L'efficacità di a biòpsia liquida in a screening precoce, u diagnosticu, a valutazione di l'efficacità è a prediczione di HCC resta da esse esplorata, soprattuttu per i gruppi d'altu risicu.A tecnulugia di biopsia liquida hà un grande putenziale è hè prevista per esse largamente usata in a pratica clinica di u cancru di fegatu in un futuru vicinu.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Statistiche Globali di Cancer 2020: GLOBOCAN stima l'incidenza è a mortalità da 36 tipi di cancru in 185 paesi.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi: 10.3322/caac.21660
2. Sede di a Cummissione Naziunale di Salute.Criteriums per u diagnosticu è u trattamentu di u cancer primariu di u fegatu (edizione 2022) [J].Journal of Clinical Liver Diseases, 2022, 38 (2): 288-303.doi: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Linee guida per u diagnosticu è u trattamentu di u carcinoma hepatocellular (edizione 2019).Cancer di fegatu.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Linee di pratica clinica per u carcinoma hepatocellulare: Società Giapponese per e Malattie Liver, 2017 (JSH-HCC 4th guidelines), 2019 update.Reservoir per a malatia di u fegatu.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Biopsia liquida in a malatia di fegatu crònica.Ann Hepato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Biopsia liquida di cancru di mama: una rivista focalizzata.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi: 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Surveillance for hepatocellular carcinoma: current best practices and future directions.Gastroenterologia.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Associazione Europea di Ricerca L, Organizazione Europea R, C Therapeutics.Linee cliniche EASL-EORTC: trattamentu di carcinoma hepatocellular.J Heparin.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.Analisi cumminata di AFP è HCCR-1 cum'è marcatori serologichi utili in u carcinoma hepatocellulare chjucu: un studiu di cohorte prospective.Dis Mark.2012;32(4):265–271.doi: 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Espressione differenziale di microRNA-125b di plasma in a malatia di u fegatu assuciata à u virus di l'epatite B è u putenziale diagnosticu di u carcinoma epatocellulare indotto da u virus di l'epatite B.Reservoir di malatie liver.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Biologia è significatu di l'alfa-fetoprotein in u carcinoma hepatocellular.Fegato int.2019;39(12):2214–2229.doi: 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Linee cliniche per u trattamentu di u carcinoma hepatocellular in a regione Asia-Pacificu: 2017 update.L'urganizazione internaziunale per e malatie di u fegatu.2017;11(4):317–370.doi: 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Valore diagnosticu di u serum PIVKA-II solu o in cumbinazione cù AFP in i pazienti chinesi cù carcinoma hepatocellular.Dis Mark.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Biopsia di u fluidu umorale non plasmaticu di u cancer di u pulmone non-cellule: più vicinu à u tumore!cellula.2020;9 (11).doi: 10.3390/cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Biopsia liquida: statu attuale è prospettivi futuri.Trattamentu Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Biopsia di u cancer basatu in liquidu: un strumentu di diagnosticu multimodale in oncologia clinica.L'Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Acidi nucleici in plasma umanu.CR Seances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Rilevazione avanzata di DNA di tumore circulante per analisi di dimensione di frammenti.A scienza traduce a medicina.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Lunghezza di u fragmentu di DNA di u tumore circulante.geni PLOS.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Circulating tumeur DNA: un biomarker prometitore in a biopsia di cancru basata in liquidu.tumore di destinazione.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Rilevazione di DNA di tumore circulante in i primi è tardi di i malignità umani.A scienza traduce a medicina.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Biopsia liquida per l'analisi predictiva mutazionale di u cancer solidu: perspettiva di un patologu.J Biotecnologia.2019;297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.A rilevazione precoce di tumore da u screening di DNA di plasma circulante: hype o speranza?Legge clinica belga.2020;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Effettu di u virus di l'hepatitis è l'anzianu nantu à a metilazione di l'ADN in l'hepatocarcinogenesis umana.Istopatologia.2010;25(5):647–654.doi: 10.14670/HH-25.647